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	一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立收藏 \| 浏览/下载：147/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼加入生理盐水洗涤加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液震荡20?30秒。15000g离心30分钟滤去水后立即加入无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水使细胞破壁吸取上清液使蛋白质去除而后于?20℃或室温保存备用再用滤纸吸干样品而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶然后在上清液中加入等体积异丙醇鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇重复2?3次震荡混匀轻轻混匀于50?70℃温育 ?20℃静置1?2小时每10?20分钟颠倒混匀一次 15000g离心15分钟消化至溶液澄清沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。待用
	一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛收藏 \| 浏览/下载：29/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种海蜇基因组DNA提取方法 2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300～400ul匀浆 3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl 其特征在于：1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95％的酒精中脱水并保存 30～40ul质量浓度为10％的SDS 振荡浑匀20～30S 3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K 10000～12000rpm离心20?30分钟封口后55～56℃消化0.8～1.0小时吸上清待用而后加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇 ?20～?18℃沉淀10～15分钟沉淀后取出以10000～12000rpm离心15?20分钟弃去液体并用体积浓度为70％的乙醇离心洗1～2次自然室温凉干即得到海蜇碟状体的DNA。
	吉西他滨聚L-乳酸中空微球的制备及其酶解释放行为研究期刊论文 OAI收割中国药剂学杂志(网络版), 2011, 卷号: 9, 期号: 2, 页码: 21-29 王浩; 陈学思; 邓英杰收藏 \| 浏览/下载：19/0 \| 提交时间：2012/06/12 药剂学中空微球复乳法吉西他滨药物控制释放蛋白酶K
	一种对虾肠道微生物DNA的提取方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23 刘淮德; 王雷; 刘梅; 王宝杰; 蒋克勇收藏 \| 浏览/下载：31/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 2)将洗脱液在200g离心5-10min 沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液 3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min 4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶而后加15-20μL?20％(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K 5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min 6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min 7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇 8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70％预冷乙醇其特征在于：1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨取上清菌液待用将两次离心所得上清菌液合并收集上清菌液放入37℃摇床 60-70℃水浴1-2h 取上清菌液取上清菌液而后于-20℃静置1-2h 14000g离心10-15min 并加入0.8-1.2mL?PBS 合并上清液以300g离心5-10min 振荡30-40min 而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20％SDS混匀后而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液再以4℃?14000g离心10-15min 所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。 15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5％Tween-80 取上清菌液待用涡旋 14000g离心10-15min 所得沉淀待用均匀后吹打洗脱3-5min 60-70℃水浴10-15min 取上清菌液待用
	一种海蜇基因组DNA的提取方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛收藏 \| 浏览/下载：84/0 \| 提交时间：2014/08/04 1.一种海蛰基因组DNA提取方法 2)将步骤1)得到的原料内加入3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K 3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚而后向上清液中加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇其中苯酚其特征在于：1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织在55～56℃消化24～26小时至溶液澄清氯仿和异戊醇的混合溶液混匀 -20～-18℃沉淀10～15分钟氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1 加入CTAB buffer300～400ul 待用离心沉淀后取出氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。待用吸上清离心再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀弃去液体离心并用体积浓度为70％的乙醇吸上清离心洗1～2次将多余液体倒去室温自然凉干即得到海蛰螅状体的基因组DNA
	组织蛋白酶B、K和基质金属蛋白酶9抑制剂的对接与构效关系研究学位论文 OAI收割昆明植物研究所: 中国科学院昆明植物研究所, 2007 潘蓄林 \| 收藏 \| 浏览/下载：99/0 \| 提交时间：2011/10/25 分子对接 3d-qsar 组织蛋白酶b和k 基质金属蛋白酶9 抑制剂
	多维蛋白鉴别技术分析天蓝色链霉菌膜内侧蛋白质组期刊论文 OAI收割生物工程学报, 2005, 期号: 05, 页码: 814-819 石宣明; 罗元明; 张贵锋; 苏志国; 黄玉碧; 杨克迁收藏 \| 浏览/下载：24/0 \| 提交时间：2013/11/04 天蓝色链霉菌多维蛋白鉴别技术膜蛋白组蛋白酶K 质谱拓扑学