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海洋研究所 [2]
新疆理化技术研究所 [1]
采集方式
OAI收割 [3]
内容类型
CNKI期刊论文 [1]
专利 [1]
期刊论文 [1]
发表日期
2022 [1]
2011 [1]
2009 [1]
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共3条,第1-3条
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DNA/RNA提取及处理方法对评价沉积物中纤毛虫分子多样性的影响
CNKI期刊论文
OAI收割
2022
作者:
李龙召
;
黄平平
;
徐奎栋
;
赵峰
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提交时间:2024/12/18
eDNA
eRNA
DNA/RNA提取
纤毛虫
分子多样性
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
大赖草总DNA转化小麦叶片mRNA差异显示技术中总RNA提取和反转录活性研究
期刊论文
OAI收割
安徽农业科学, 2009, 卷号: 37, 期号: 11, 页码: 4917-4919
作者:
李静
;
赵民安
;
郝秀英
;
王晓军
;
曹玉锦
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提交时间:2012/11/29
大赖草总DNA转化小麦
差别显示
RNA
提取
反转录活性