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机构
海洋研究所 [6]
广州能源研究所 [2]
生态环境研究中心 [1]
采集方式
OAI收割 [9]
内容类型
专利 [6]
期刊论文 [3]
发表日期
2013 [1]
2012 [2]
2011 [2]
2006 [2]
2005 [1]
1994 [1]
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学科主题
环境科学::环境化学 [1]
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共9条,第1-9条
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扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409878.6, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
宋林生
;
邱丽梅
;
刘瑞
;
张峘
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提交时间:2014/08/04
一种扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法
其中所述的引物为:16S rDNA:上游引物16Srtf:5’‑AGAACCTTACCTACTCTTGACATCC‑3’
金属蛋白酶基因:上游引物spf1:5’‑ATGGCACAAGGGATCAGCGG‑3’
其特征在于:以待检测的过滤海水样品中细菌基因组总DNA为模版
下游引物16Srtr:5’‑CCCAACATTTCACAACACGA‑3’
下游引物spf2:5’‑GGATAAGAGGAAGCGATAAAGAA‑3’。
利用细菌16SrDNA保守区域和致病性灿烂弧菌金属蛋白酶基因的特异性的引物进行荧光定量PCR扩增和定量分析检测养殖环境中扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus
一种检测荧光原位杂交质量控制的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110341817.1, 申请日期: 2012-05-02, 公开日期: 2012-05-02
作者:
相建海
;
郇聘
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提交时间:2014/08/04
一种荧光原位杂交过程的质量控制方法
其特征在于:载玻片经多聚赖氨酸处理后
设置不同的DNA样品区
将不同DNA样品溶液分别加到其上
风干后经紫外交联仪照射
使DNA结合到玻片上
得到简化的染色体片
而后进行免疫检测
通过不同区域信号的反应得出荧光原位杂交过程的质量反馈。
一种BAC DNA指纹分析的标记方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010280134.5, 申请日期: 2012-04-04, 公开日期: 2012-04-04
作者:
相建海
;
郇聘
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提交时间:2014/08/04
一种BAC?DNA指纹分析的标记方法
2)采用一种荧光标记的dUTP和Taq?DNA聚合酶对酶切后的BAC?DNA片段进行标记
其特征在于:1)将BAC?DNA样品采用限制性内切酶进行酶切
然后即可用于ABI测序仪上进行DNA片段分析。
得酶切的BAC?DNA片段
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
崔朝霞
;
张姝
;
栾维莎
;
刘媛
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提交时间:2014/08/04
一种海蜇基因组DNA提取方法
2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆
3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl
其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存
30~40ul质量浓度为10%的SDS
振荡浑匀20~30S
3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K
10000~12000rpm离心20?30分钟
封口后55~56℃消化0.8~1.0小时
吸上清
待用
而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇
?20~?18℃沉淀10~15分钟
沉淀后取出
以10000~12000rpm离心15?20分钟
弃去液体
并用体积浓度为70%的乙醇
离心洗1~2次
自然室温凉干
即得到海蜇碟状体的DNA。
连续流动式聚合酶链式反应生物芯片/微装置中脱氧核糖核酸样品的驱动控制技术进展
期刊论文
OAI收割
理化检验:化学分册, 2006, 卷号: 42, 期号: 12, 页码: 1063-1068
章春笋
;
徐进良
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提交时间:2009/12/09
连续流动式PCR生物芯片/微装置
DNA样品
驱动控制技术
Continuous-flow polymerase chain reaction Bio-chip
DNA sample
Actuation control technique
连续流动式聚合酶链式反应生物芯片/微装置中脱氧核糖核酸样品的驱动控制技术进展
期刊论文
OAI收割
理化检验. B, 化学分册, 2006, 卷号: 42, 期号: 12, 页码: 1063
作者:
章春笋
;
徐进良
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提交时间:2021/11/01
连续流动式PCR生物芯片/微装置
DNA样品
驱动控制技术
龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
段德麟
;
李文红
;
胡自民
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浏览/下载:62/0
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提交时间:2014/08/04
1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
提取缓冲液的组成为:100mmolL-1Tris.HCl
(2)PCR扩增:龙须菜ITS区扩增的特异引物P1
P2:5’GGGATCCATATGCTTAAGTTCAGCGGGT3’
利用该引物对步骤(1)提取的DNA为模板
(3)PCR产物纯化
(4)DNA序列测定:纯化后的DNA进行序列测定
(5)DNA序列数据分析:待分析的rDNAITS区的序列一经测定
建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的RAPD和ISSR特异指纹图谱
2)RAPD和ISSR引物的合成
3)根据扩增条带的多态性
其特征在于:龙须菜的rDNAITS全序列的获取
pH8.0
P2的序列分别为:P1:5’GGGATCCGTTTCCGTAGGTGAACCTGC3’
位于26S上
对总DNA进行PCR扩增反应
确立rDNAITS区
用对位排列软件ClustalW进行对位排列
步骤如下:1)总DNA提取
从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物
构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的RAPD和ISSR特异指纹图谱。
步骤如下:(1)总DNA提取:取新鲜健康的藻体材料
50-100mmolL-1EDTA
位于18S上
包括ITS1和5.8S区的全序列
并辅以人工校对
用无菌水处理后
0.2-0.5MNaCl
用系统进化分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异
在液氮种研磨成粉末
5%β-巯基乙醇
提取总DNA
0.2%PVP-40
1.0-2.5%SDS
提取所用的KAc浓度为4.0-5.0M
pH值范围在5.2-7.5
~(32)P后标记法检测生物样品的DNA加合物
期刊论文
OAI收割
卫生毒理学杂志, 1994, 期号: 4, 页码: 285-286
作者:
刘淑芬
;
蒋湘宁
;
徐晓白
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提交时间:2012/03/29
生物样品
~(32)P
后标记法
加合物
DNA加合
反相薄层色谱
核酸酶
中国科学院
环氧苯乙烯
自然科学基金会