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	一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22 作者: 黄雯收藏 \| 浏览/下载：62/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法 2）研磨后进行低温干燥 3）将A部分样品准确称量干重后 4）8000?12000rpm离心5?10min 5）取步骤4）中的上清即总甲状腺素T4和总3 6）将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上 7）将步骤6）中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量 8）将数据整合其特征在于:该方法包括如下步骤：1）将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状分成AB两部分分别用于以下步骤按固定比例加入0.01mol/L?NaOH溶液取上清用于定量检测甲状腺激素的含量 5 裂解细胞释放蛋白计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克 2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素 3′?三碘甲腺原氨酸T3 即xg/gprotein。
	一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201110416253.3, 申请日期: 2012-06-20, 公开日期: 2012-06-20 作者: 戚鹏收藏 \| 浏览/下载：26/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法其特征在于：将待测样品离心后沉淀于选择性培养基中厌氧条件下培养3?4天离心取上清液并加入上清液1/9体积的硝酸锌溶液混合均匀后离心取沉淀沉淀中加入亚甲基蓝溶液混合均匀后在紫外灯下照射1.5?2.0小时即可通过吸光度待测样品中检测硫酸盐还原菌。
	一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立收藏 \| 浏览/下载：150/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼加入生理盐水洗涤加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液震荡20?30秒。15000g离心30分钟滤去水后立即加入无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水使细胞破壁吸取上清液使蛋白质去除而后于?20℃或室温保存备用再用滤纸吸干样品而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶然后在上清液中加入等体积异丙醇鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇重复2?3次震荡混匀轻轻混匀于50?70℃温育 ?20℃静置1?2小时每10?20分钟颠倒混匀一次 15000g离心15分钟消化至溶液澄清沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。待用
	一种植物空心胶囊生物等效性评价方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200910255701.9, 申请日期: 2011-06-22, 公开日期: 2011-06-22 韩丽君; 袁毅; 李敬; 吴佩收藏 \| 浏览/下载：72/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种植物空心胶囊生物等效性评价方法 (2)取植物空心胶囊制成口服给药药剂 (3)分别取服用上述药后20?30分钟中青年人或动物静脉血浆200?250μL 直至中青年人或动物服药后10?12小时为止 (4)分别于各组所取待测血浆加入内标液600?650μL 测定血浆中布洛芬的含量的变化根据采集志愿者血浆获得的血药浓度?时间数据以明胶空心胶囊布洛芬胶囊剂为参比计算相对生物利用度根据生物利用度评价生物等效性其特征在于：(1)按重量比计动物明胶空心胶囊分别充填布洛芬混合物0.25?0.40克剂量分别为中青年人或动物每次口服1?2粒以后每间隔30?120分钟取服药后20?30分钟中青年人或动物静脉血浆200?250μL 共需静脉血浆10?16份内标液为浓度10mg/L甲醇的吲哚美辛用DAS?2.0计算主要药代动力学参数采用[1?2α]置信区间法分析其生物等效性。布洛芬纯品80?100％振荡包括峰浓度(Cmax) 淀粉和/或硬脂酸镁含量为20％的混合物为固定模型药物标准品 12000?18000rpm离心8?12min 达峰时间(Tmax)及平均残留时间(MRT) 取上清高效液相色谱测定检测波长为220?230nm
	一种对虾肠道微生物DNA的提取方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23 刘淮德; 王雷; 刘梅; 王宝杰; 蒋克勇收藏 \| 浏览/下载：31/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 2)将洗脱液在200g离心5-10min 沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液 3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min 4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶而后加15-20μL?20％(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K 5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min 6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min 7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇 8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70％预冷乙醇其特征在于：1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨取上清菌液待用将两次离心所得上清菌液合并收集上清菌液放入37℃摇床 60-70℃水浴1-2h 取上清菌液取上清菌液而后于-20℃静置1-2h 14000g离心10-15min 并加入0.8-1.2mL?PBS 合并上清液以300g离心5-10min 振荡30-40min 而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20％SDS混匀后而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液再以4℃?14000g离心10-15min 所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。 15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5％Tween-80 取上清菌液待用涡旋 14000g离心10-15min 所得沉淀待用均匀后吹打洗脱3-5min 60-70℃水浴10-15min 取上清菌液待用
	一种分离纯化组蛋白H4的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200610047932.7, 申请日期: 2008-04-02, 公开日期: 2008-04-02 作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华收藏 \| 浏览/下载：56/0 \| 提交时间：2014/08/04 1 而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min (2)分离纯化：①加样前样品预处理：将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中 ②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中 ③洗脱：采用含有NaCl的缓冲液一种分离纯化组蛋白H4的方法取上清液备用每隔8-12min搅拌一次用3-5倍床体积的缓冲液淋洗以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱其特征在于包括以下步骤：(1)提取样品：将50g-150g的海蜇样品破碎共搅拌2-6次收集组分。然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液而后在相对离心力为573-1467g下放入2℃-6℃下离心5-10min 浸泡0.5-48hh 弃去上清液
	一种制备海带孢子体大分子量DNA的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200410011416.X, 申请日期: 2006-07-12, 公开日期: 2006-07-12 段德麟; 王高歌; 胡自民收藏 \| 浏览/下载：35/0 \| 提交时间：2014/08/04 1.一种制备海带孢子体大分子量DNA的方法 2)将上述材料置于液氮中 3)将藻粉转入SDS提取缓冲液中 4)加入KAc溶液 5)离心 6)离心 7)离心其特征在于：可按如下步骤操作迅速研成粉末 63～65℃保温30min 混合均匀取上清水相用异丙醇于-18～-20℃沉淀乙醇洗沉淀 1)取海带孢子体在清水中清洗后第二次去多糖加入氯仿：异戊醇抽提稍干后溶于TE中放入去多糖溶液中冲洗加入RNase 以去除海带孢子体表面的多糖得产品。